Nuevos enfoques para la detección de muermo/ Glanders diagnosis with western blot

Título en Español: Uso de Western Blot para efectuar el serodiagnóstico de muermo

Título original: Use of a Western blot technique for the serodiagnosis of glanders

Autores: Mandy C Elschner1*, Holger C Scholz2, Falk Melzer1, Muhammad Saqib3,4, Peggy Marten1, Astrid Rassbach1, Michael Dietzsch1, Gernot Schmoock1, Vania L de Assis Santana5, Marcilia MA de Souza5, Renate Wernery6, Ulrich Wernery6, Heinrich Neubauer1

Publicado en : BMC Veterinary Research 2011, 7:4

Resumen en Inglés
Background: The in vivo diagnosis of glanders relies on the highly sensitive complement fixation test (CFT). Frequently observed false positive results are troublesome for veterinary authorities and cause financial losses to animal owners. Consequently, there is an urgent need to develop a test with high specificity. Hence, a Western blot assay making use of a partly purified lipopolysaccaride (LPS) containing antigen of three Burkholderia mallei strains was developed. The test was validated investigating a comprehensive set of positive and negative sera
obtained from horses and mules from endemic and non endemic areas.
Results: The developed Western blot assay showed a markedly higher diagnostic specificity when compared to
the prescribed CFT and therefore can be used as a confirmatory test. However, the CFT remains the test of choice for routine testing of glanders due to its high sensitivity, its feasibility using standard laboratory equipment and its worldwide distribution in diagnostic laboratories.
Conclusions: The CFT should be amended by the newly validated Western blot to increase the positive likelihood ratio of glanders serodiagnosis in non endemic areas or areas with low glanders prevalence. Its use for nternational trade of horses and mules should be implemented by the OIE.

Resumen en Español
Antecedentes: El diagnóstico in vivo del muermo se realiza mediante el test altamente sensible de fijación de complemento (CFT).
Los resultados falsos positivos que se observan frecuentemente son problemáticos para los veterinarios y provocan pérdidas económicas para los dueños animales. Por lo tanto existe una necesidad urgente de desarrollar una prueba con especificidad alta. En respuesta a ésta necesidad, se desarrolló un test de Western blot que hace uso de un lipopolisacárido parcialmente purificado (LPS) que contiene el antígeno de tres cepas de Burkholderia mallei. El test fue validado utilizando un conjunto de sueros positivos y negativos obtenidos de caballos y mulas provenientes de zonas endémicas y no endémicas.

Resultados: El test de Western blot desarrollado presentó una especificidad de diagnóstico notablemente más alta en comparación con el CFT y por consiguiente puede ser utilizado como una prueba confirmatoria. Sin embargo, el CFT sigue siendo la prueba de opción para la evaluación de rutina de muermo debido a su elevada sensibilidad, a que es fácilmente realizable en un equipo de laboratorio normal y su distribución mundial en los laboratorios de diagnóstico.

Conclusiones: El CFT debe ser complementado con el test de Western blot recientemente validado para aumentar la probabilidad positiva de índice de serodiagnosis del muermo en áreas que no son endémicas o áreas con baja incidencia de muermo. La OIE debería implementar su uso en el ámbito del comercio internacional de caballos y mulas.

Medicina Vaterinaria: Efectos del transporte sobre las hormonas de estrés en caballos, Stress hormones in stallions

Título en Español: Niveles en circulación de beta endorfina, hormona corticotropina y cortisol en sementales antes y después del transporte terrestre: efectos del estrés de las diferentes distancias

Título original: Circulating β-endorphin, adrenocorticotrophic hormone and cortisol levels of stallions before and after short road transport: stress effect of different distances

Autores: Esterina Fazio*1, Pietro Medica1, Vincenzo Aronica1, Loredana Grasso2 and
Adriana Ferlazzo1

1Department of Morphology, Biochemistry, Physiology and Animal Production, Unit of Veterinary Physiology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Messina, 98168 Messina, Italy
2Unit of Clinical Biochemistry, University General Hospital (Gaetano Martino),University of Messina, 98168 Messina, Italy

Publicado en: Acta Veterinaria Scandinavica 2008, 50:6

Resumen en Ingles
Background: Since transport evokes physiological adjustments that include endocrine responses,
the objective of this study was to examine the responses of circulating β-endorphin, adrenocorticotrophic hormone (ACTH) and cortisol levels to transport stress in stallions.
Methods: Forty-two healthy Thoroughbred and crossbred stallions were studied before and after road transport over distances of 100, 200 and 300 km. Blood samples were collected from the jugular vein: first in a single box immediately before loading (pre-samples), then immediately after transport and unloading on arrival at the breeding stations (post-samples).
Results: An increase in circulating β-endorphin levels after transport of 100 km (P < 0.01), compared to basal values was observed. Circulating ACTH levels showed significant increases after transport of 100 km (P < 0.001) and 200 km (P < 0.001). Circulating cortisol levels showed significant increases after road transport over distances of 100, 200 and 300 km (P < 0.001). An effect of transport on β-endorphin, ACTH and cortisol variations was therefore evident for the different distances studied. No significant differences (P > 0.05) between horses of different ages and different breeds were observed for β-endorphin, ACTH and cortisol levels.
Conclusion: The results obtained for short term transportation of stallions showed a very strong
reaction of the adrenocortical system. The lack of response of β-endorphin after transport of
200–300 km and of ACTH after transport of 300 km seems to suggest a soothing effect of negative feedback of ACTH and cortisol levels.

Resumen en Español
Antecedentes: Dado que el transporte provoca ajustes fisiológicos que incluyen las respuestas endocrinas, el objetivo de este estudio fue examinar las respuestas de los niveles circulantes de β-endorfina, hormona corticotropina (ACTH) y cortisol frente al estrés por transporte en sementales.
Métodos: Cuarenta y dos sementales de pura sangre y mestizos saludables fueron estudiados antes y después de ser transportados distancias de 100, 200 y 300 km por tierra. Se recolectaron muestras de sangre de la vena yugular inmediatamente antes de ser cargados (muestras Pre), luego inmediatamente después del transporte y finalmente al ser descargados en la llegada a la estación de cría (muestras Post).
Resultados: Se observó un aumento en los niveles circulantes de β-endorfina después del transporte de 100 km (P <0.01), en comparación con los valores observados al inicio. Luego del transporte de 100 km (P <0.001) y 200 km (P <0.001) se observaron aumentos significativos en los niveles circulantes de ACTH. Los niveles circulantes de cortisol presentaron aumentos significativos después del transporte a lo largo de 100, 200 y 300 km (P <0.001). Por lo tanto es evidente el efecto del transporte sobre las variaciones de β-endorfina, ACTH y cortisol en las diferentes distancias analizadas. No se observaron diferencias significativas (P> 0.05) entre los caballos de diferentes edades y de diferentes razas en los niveles de β-endorfina, ACTH y cortisol.
Conclusión: Los resultados obtenidos para el transporte de corta distancia de sementales, revelaron una reacción muy fuerte del sistema adrenocortical. La ausencia de respuesta en β-endorfina después del transporte de 200–300 km y de ACTH después del transporte de 300 km sugiere que existiría un efecto disparador de feedback negativo de los niveles de ACTH y de cortisol.