martes, 21 de junio de 2011

Nuevos enfoques para la detección de muermo/ Glanders diagnosis with western blot

Título en Español: Uso de Western Blot para efectuar el serodiagnóstico de muermo

Título original: Use of a Western blot technique for the serodiagnosis of glanders

Autores: Mandy C Elschner1*, Holger C Scholz2, Falk Melzer1, Muhammad Saqib3,4, Peggy Marten1, Astrid Rassbach1, Michael Dietzsch1, Gernot Schmoock1, Vania L de Assis Santana5, Marcilia MA de Souza5, Renate Wernery6, Ulrich Wernery6, Heinrich Neubauer1

Publicado en : BMC Veterinary Research 2011, 7:4

Resumen en Inglés
Background: The in vivo diagnosis of glanders relies on the highly sensitive complement fixation test (CFT). Frequently observed false positive results are troublesome for veterinary authorities and cause financial losses to animal owners. Consequently, there is an urgent need to develop a test with high specificity. Hence, a Western blot assay making use of a partly purified lipopolysaccaride (LPS) containing antigen of three Burkholderia mallei strains was developed. The test was validated investigating a comprehensive set of positive and negative sera
obtained from horses and mules from endemic and non endemic areas.
Results: The developed Western blot assay showed a markedly higher diagnostic specificity when compared to
the prescribed CFT and therefore can be used as a confirmatory test. However, the CFT remains the test of choice for routine testing of glanders due to its high sensitivity, its feasibility using standard laboratory equipment and its worldwide distribution in diagnostic laboratories.
Conclusions: The CFT should be amended by the newly validated Western blot to increase the positive likelihood ratio of glanders serodiagnosis in non endemic areas or areas with low glanders prevalence. Its use for nternational trade of horses and mules should be implemented by the OIE.

Resumen en Español
Antecedentes: El diagnóstico in vivo del muermo se realiza mediante el test altamente sensible de fijación de complemento (CFT).
Los resultados falsos positivos que se observan frecuentemente son problemáticos para los veterinarios y provocan pérdidas económicas para los dueños animales. Por lo tanto existe una necesidad urgente de desarrollar una prueba con especificidad alta. En respuesta a ésta necesidad, se desarrolló un test de Western blot que hace uso de un lipopolisacárido parcialmente purificado (LPS) que contiene el antígeno de tres cepas de Burkholderia mallei. El test fue validado utilizando un conjunto de sueros positivos y negativos obtenidos de caballos y mulas provenientes de zonas endémicas y no endémicas.

Resultados: El test de Western blot desarrollado presentó una especificidad de diagnóstico notablemente más alta en comparación con el CFT y por consiguiente puede ser utilizado como una prueba confirmatoria. Sin embargo, el CFT sigue siendo la prueba de opción para la evaluación de rutina de muermo debido a su elevada sensibilidad, a que es fácilmente realizable en un equipo de laboratorio normal y su distribución mundial en los laboratorios de diagnóstico.

Conclusiones: El CFT debe ser complementado con el test de Western blot recientemente validado para aumentar la probabilidad positiva de índice de serodiagnosis del muermo en áreas que no son endémicas o áreas con baja incidencia de muermo. La OIE debería implementar su uso en el ámbito del comercio internacional de caballos y mulas.

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